Principio del metro clorofilla

Principio del metro clorofilla

In base all'assorbimento dello spettro visibile mediante l'estratto di pigmento cloroplastico, l'assorbanza viene misurata a una lunghezza d'onda specifica da uno spettrofotometro e il contenuto di ciascun pigmento nell'estratto può essere calcolato mediante la formula. Secondo la legge di Lambert-Beer, l'assorbanza A di una soluzione colorata è proporzionale alla concentrazione di soluto C e allo spessore L dello strato liquido, cioè A = αCL: α costante proporzionale.

Quando la concentrazione della soluzione è espressa in unità di concentrazione percentuale e lo spessore dello strato liquido è 1 cm, α è il coefficiente di assorbimento della sostanza. Il coefficiente di assorbimento di varie soluzioni di sostanze colorate a diverse lunghezze d'onda può essere ottenuto misurando l'assorbanza di sostanze pure a lunghezze d'onda conosciute a diverse lunghezze d'onda.

Se nella soluzione ci sono diversi tipi di sostanze che assorbono la luce, l'assorbanza totale del liquido miscelato a una determinata lunghezza d'onda è uguale all'assorbanza completa di ciascun componente alla lunghezza d'onda corrispondente. Questa è l'additività dell'assorbanza. Per determinare il contenuto di clorofilla a, b e carotenoidi nell'estratto di pigmento cloroplastico, è solo necessario determinare l'assorbanza A dell'estratto a tre specifiche lunghezze d'onda, e secondo la clorofilla a, b e i carotenoidi a questa lunghezza d'onda. Il coefficiente di assorbanza può essere utilizzato per determinare la concentrazione. Al fine di eliminare l'interferenza dei carotenoidi durante la misurazione della clorofilla aeb, la lunghezza d'onda della luce monocromatica utilizzata seleziona il picco massimo di assorbimento della clorofilla nella regione rossa.

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